公司提供2種形式的9L細(xì)胞，小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞株：

一種是凍存產(chǎn)品，由液氮直接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，-80C也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；再者干冰運(yùn)輸需要額外添加運(yùn)費(fèi)(順豐)。

另一種是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，運(yùn)費(fèi)較低(聯(lián)邦或順豐)。

上?；鄯f生物科技有限公司坐落于美麗的嘉定南翔鎮(zhèn)，2014年獲得澳洲BOVOGEN產(chǎn)品代理權(quán)，2015年獲得德國(guó)SERANA產(chǎn)品總銷售權(quán)，為國(guó)內(nèi)科研機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)動(dòng)物血清和蛋白產(chǎn)品。

慧穎生物為完善的產(chǎn)品供應(yīng)渠道和售后服務(wù)。我們力求工作*，在處理客戶的咨詢、訂購(gòu)、到貨、售后服務(wù)、等方面追求更專業(yè)、更快捷、更及時(shí)。

上?；鄯f生物的經(jīng)營(yíng)原則是“質(zhì)量*，誠(chéng)信*”，以“質(zhì)量是企業(yè)的生命，誠(chéng)信是經(jīng)營(yíng)的資本”為警醒，嚴(yán)把所售出商品的質(zhì)量關(guān)，不做任何有損顧客利益的事情。

一直以來(lái)慧穎生物都為廣大科研工作者的工作提供材料或者是研究條件，我們是依托廣大科研工作者的信任才能發(fā)展至今，并且與廣大科研者的科研工作一直成長(zhǎng)，我們對(duì)此一直非常感謝眾多的新老顧客，如今又是一年的試劑購(gòu)買旺季，我們素爾生物也是為了感謝并且回饋廣大新老顧客，特推出素爾熱賣動(dòng)物血清，確保正品，確保質(zhì)量穩(wěn)定，爭(zhēng)取批次間差異降到zui小，真正的讓您感到物有所值。素爾生物在此希望廣大科研工作的工作可以步步皆高，生活如意幸福。

慧穎細(xì)胞庫(kù)400種類細(xì)胞株細(xì)胞系，20多株耐藥株，超低折扣，種類涵蓋：成纖維細(xì)胞 長(zhǎng)尾綠猴胚胎細(xì)胞 長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞 小鼠乳腺癌細(xì)胞 人膀胱癌細(xì)胞 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人甲狀腺癌細(xì)胞 卵巢癌細(xì)胞 干細(xì)胞 結(jié)腸癌細(xì)胞 胃癌細(xì)胞 乳腺類細(xì)胞 等

以下為購(gòu)買細(xì)胞系后的售后小知識(shí)：

1、CO2 培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？

定期（至少每?jī)芍芤淮危?以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之。

2、為何培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中， 顏色會(huì)偏暗紅色， 且pH值會(huì)越來(lái)越偏堿性？

培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中， 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會(huì)逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑（通常為phenol red） 的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果， 將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí)， 可以通入無(wú)菌過(guò)濾之CO2， 以調(diào)整pH 值。

3、各種細(xì)胞培養(yǎng)用的dish，flask是否均相同？

不同廠牌的dish 或flask， 其所coating 的polymer 不同， 制造程序亦不同， 雖對(duì)大部分細(xì)胞沒(méi)有太大之影響， 惟少數(shù)細(xì)胞則可能因使用廠牌不同之dish 或flask 而有顯著之生長(zhǎng)差異。

4、購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？ 購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？

研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳， 常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后， 加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80℃太久。

我公司出售Elisa試劑盒，一抗，二抗，動(dòng)物血清，細(xì)胞株細(xì)胞系，標(biāo)準(zhǔn)品，生化試劑，日本三菱厭氧罐及安寧包系列，GE填料以及凝膠系列產(chǎn)品，質(zhì)粒以及質(zhì)粒搭建。

一個(gè)合格的質(zhì)粒含有以下組成部分：

復(fù)制起始位點(diǎn)Ori：即控制復(fù)制起始的位點(diǎn)。原核生物DNA分子中只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)，而真核生物DNA分子有多個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)。

抗生素抗性基因：可以便于篩選或檢測(cè)，如Amp+ 、Kan+。

多克隆位點(diǎn)MCS：克隆攜帶外源基因片段。

P/E：?jiǎn)?dòng)子/增強(qiáng)子。

Terms：終止信號(hào)。

加poly(A)信號(hào)：可以起到穩(wěn)定 mRNA 作用。

 如何閱讀質(zhì)粒圖譜：

*步：首先看 Ori 的位置，了解質(zhì)粒的類型（原核/真核/穿梭質(zhì)粒）。

第二步：再看篩選標(biāo)記，如抗性，決定使用什么篩選標(biāo)記。

--Ampr   水解β-內(nèi)酰胺環(huán)，解除氨芐的毒性；

--tetr   可以阻止四環(huán)素進(jìn)入細(xì)胞；

--camr   生成氯霉素羥乙?；苌?，使之失去毒性；

--neor(kanr)   氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 使G418（長(zhǎng)那霉素衍生物）失活；

--hygr   使潮霉素β失活。

第三步：看多克隆位點(diǎn)（MCS）。它具有多個(gè)限制酶的單一切點(diǎn)，便于外源基因的插入。如果在這些位點(diǎn)外有外源基因的插入，會(huì)導(dǎo)致某種標(biāo)志基因的失活，從而便于篩選。MCS決定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。

第四步：再看外源DNA插入片段大小。質(zhì)粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA片段。一般來(lái)說(shuō)，外源DNA片段越長(zhǎng)，越難插入，越不穩(wěn)定，轉(zhuǎn)化效率越低。

第五步：是否含有表達(dá)系統(tǒng)元件，即啟動(dòng)子－核糖體結(jié)合位點(diǎn)－克隆位點(diǎn)－轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)，這是用來(lái)區(qū)別克隆載體與表達(dá)載體。在克隆載體中加入一些與表達(dá)調(diào)控有關(guān)的元件即成為表達(dá)載體。選用哪種載體，要以實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑橐罁?jù)。

啟動(dòng)子：促進(jìn)DNA轉(zhuǎn)錄的DNA序列，這個(gè)DNA區(qū)域常在基因或操縱子編碼順序的上游，是DNA分子上可以與RNApol特異性結(jié)合并使之開始轉(zhuǎn)錄的部位，但啟動(dòng)子本身不被轉(zhuǎn)錄。

增強(qiáng)子/沉默子：增強(qiáng)子為真核基因組（包括真核病毒基因組）中的一種具有增強(qiáng)鄰近基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程的調(diào)控序列，其作用與增強(qiáng)子所在的位置或方向無(wú)關(guān)（即在所調(diào)控基因上游或下游均可發(fā)揮作用）。/沉默子：負(fù)增強(qiáng)子，負(fù)調(diào)控序列。

核糖體結(jié)合位點(diǎn)/起始密碼/SD序列（Rbs/AGU/SDs）：mRNA有核糖體的兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，對(duì)于原核而言是AUG（起始密碼）和 SD序列。

轉(zhuǎn)錄終止順序（終止子）/翻譯終止密碼子：結(jié)構(gòu)基因的zui后一個(gè)外顯子中有一個(gè) AATAAA的保守序列，此位點(diǎn)down-stream有一段GT或T富豐區(qū)，這2部分共同構(gòu)成poly(A）加尾信號(hào)。

為什么質(zhì)粒圖譜上有的箭頭順時(shí)針有的箭頭逆時(shí)針？那其實(shí)是代表兩條DNA鏈，即質(zhì)粒是環(huán)狀雙鏈 DNA，它的啟動(dòng)子等在其中一條鏈上，而它的抗性基因在另一條鏈上。

如何選擇載體

把目的基因通過(guò)基因工程手段送到生物細(xì)胞（受體細(xì)胞），需要運(yùn)載工具（交通工具）攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞，這種運(yùn)載工具就叫做載體（vector）?；蚬こ趟玫膙ector實(shí)際上是用來(lái)攜帶目的基因片段進(jìn)入受體細(xì)胞的 DNA。

選擇載體主要依據(jù)構(gòu)建的目的，同時(shí)要考慮載體中應(yīng)有合適的限制酶切位點(diǎn)。如果構(gòu)建的目的是要表達(dá)一個(gè)特定的基因，則要選擇合適的表達(dá)載體。

產(chǎn)品名稱：9L細(xì)胞

中文名稱：小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

種屬：小鼠

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)|懸浮生長(zhǎng)|半貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣|成纖維樣|圓形|球形|梭形|不規(guī)則形態(tài)

周期：凍存細(xì)胞3-4個(gè)工作日發(fā)貨，復(fù)蘇細(xì)胞1-2周發(fā)貨

質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，超低折扣價(jià)格，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。

細(xì)胞到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

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ATCC細(xì)胞|癌細(xì)胞|復(fù)蘇細(xì)胞|貼壁細(xì)胞|國(guó)產(chǎn)細(xì)胞|正常細(xì)胞株|Sceiencell細(xì)胞|耐DDP細(xì)胞|耐藥株建系 盡在素爾生物 值得信賴

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A2780細(xì)胞 A2780/DDP細(xì)胞 MC38細(xì)胞 SH-SY5Y細(xì)胞 DC2.4細(xì)胞 HT-22細(xì)胞 HOS細(xì)胞 HEK-293-6E細(xì)胞 HK-2細(xì)胞 MC3T3-E1細(xì)胞 熱賣

9L細(xì)胞，小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞株 細(xì)胞吹打經(jīng)驗(yàn)之談：

急速的反復(fù)吹打肯定容易產(chǎn)生泡沫，這對(duì)細(xì)胞不利，所以我們要盡量避免。在操作時(shí)盡量選用較大口的吸管，吸液時(shí)先將吸管內(nèi)空氣排空，再深入液面以下吸液，吹打細(xì)胞時(shí)，盡量沿著壁吹出液體，操作輕柔，就可zui大程度避免泡沫的產(chǎn)生！

1.有一些細(xì)胞可以不用消化液就能夠吹打下來(lái)。個(gè)人認(rèn)為能不用消化液是的。譬如巨噬細(xì)胞。一直維持巨噬細(xì)胞，每次傳代都不用消化液，吹打的時(shí)候一般會(huì)用瓶?jī)?nèi)未換的剩余舊培養(yǎng)液，這樣比用新的培養(yǎng)基可以減少點(diǎn)泡沫的生成。當(dāng)然這個(gè)一定要求原培養(yǎng)基未被污染。

2. 吹打的時(shí)候我們都知道要一點(diǎn)挨著一點(diǎn)吹，這樣不會(huì)漏掉地方。而每次都會(huì)首先沿著兩條對(duì)角線的方向吹打，然后再按照橫著或者是豎著吹打。這樣就可以比較容易把細(xì)胞吹下來(lái)，因?yàn)槭紫燃?xì)胞的各個(gè)方向都受力了，而且比較均勻，細(xì)胞比較容易下來(lái)，而且對(duì)細(xì)胞形態(tài)的維護(hù)比較好。

3.對(duì)膠頭滴管的要求。膠頭滴管頭部是做成彎曲45度角的形狀，一般都是自己用止血鉗夾住頭部在酒精燈上燒彎。發(fā)現(xiàn)，如果吹打的時(shí)候，滴管的頭部邊緣如果是和吹打平面平行的話，反而容易產(chǎn)生泡沫，貼在底部吹，也容易產(chǎn)生泡沫，是能夠有一個(gè)角度順著你吹打的方向和滴管*。并且稍微遠(yuǎn)離吹打面，這樣滴管內(nèi)的液體容易流出，阻力會(huì)減小，就不會(huì)產(chǎn)生那么多的泡沫了。

4.控制吹打的節(jié)奏，急速地吹打會(huì)很快地產(chǎn)生泡沫，用力越大，越容易產(chǎn)生。是能夠把握住自己的力度和節(jié)奏，有條不紊的吹打。是以自己拿滴管用手的輕松程度為準(zhǔn)，如果剛吹幾下很快就累的話，那就證明是節(jié)奏過(guò)快。吹完都不累的話那就是太慢力度也不夠。一般在吹完一遍時(shí)指頭發(fā)困會(huì)比較好。這樣的節(jié)奏能夠比較快速而且有效地完成。

覺(jué)得zui關(guān)鍵的操作是不要吹打到底。

培養(yǎng)細(xì)胞多年，避免氣泡產(chǎn)生要注意以下兩點(diǎn)：

1 吹打用的培養(yǎng)基不能太少，如果只有1-2mL，氣泡難以避免；

2 吸管每次打出液體后立刻深入液面下吸取液體。

相關(guān)9L細(xì)胞，小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞株熱賣產(chǎn)品：

5637細(xì)胞株    M     urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    NS    不明確

1321N1細(xì)胞株        M     central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         astrocytoma    星形細(xì)胞瘤

143B細(xì)胞株   F       bone         骨骼         NS    不明確

22Rv1細(xì)胞株 M     prostate  前列腺     NS    不明確

23132/87細(xì)胞株    M     stomach  胃；腹部         adenocarcinoma      腺癌；惡性腺瘤

253J 細(xì)胞株     urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    transitional_cell_carcinoma    移行細(xì)胞癌

253J-BV細(xì)胞株       U      urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    transitional_cell_carcinoma    移行細(xì)胞癌

42-MG-BA細(xì)胞株   M     central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         astrocytoma_Grade_IV  星形細(xì)胞瘤分級(jí)IV

59M F細(xì)胞株  ovary        卵巢         NS    不明確

639-V細(xì)胞株  M     urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    transitional_cell_carcinoma    移行細(xì)胞癌

647-V細(xì)胞株  M     urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    transitional_cell_carcinoma    移行細(xì)胞癌

769-P細(xì)胞株  F       kidney       腎臟         clear_cell_renal_cell_carcinoma     透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌

786-O細(xì)胞株  M     kidney       腎臟         clear_cell_renal_cell_carcinoma     透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌

8305C細(xì)胞株 F       thyroid     甲狀腺；甲狀軟骨；甲狀腺劑     anaplastic_carcinoma     未分化癌

8505C細(xì)胞株 F       thyroid     甲狀腺；甲狀軟骨；甲狀腺劑     anaplastic_carcinoma     未分化癌

8-MG-BA F細(xì)胞株  central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         astrocytoma_Grade_IV  星形細(xì)胞瘤分級(jí)IV

A101D細(xì)胞株          M     skin  皮膚；外皮     NS    不明確

A1207細(xì)胞株          central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         NS    不明確

A172細(xì)胞株   M     central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         astrocytoma_Grade_IV  星形細(xì)胞瘤分級(jí)IV

A-204細(xì)胞株  F       soft_tissue       軟組織     NS    不明確

A2058細(xì)胞株 M     skin  皮膚；外皮     NS    不明確

A-253細(xì)胞株  M     salivary_gland 唾腺         mucoepidermoid_carcinoma  粘液表皮樣癌；粘表皮癌

A2780細(xì)胞株 F       ovary        卵巢         adenocarcinoma      惡性腫瘤，腺癌

A3/KAW細(xì)胞株       F       haematopoietic_and_lymphoid_tissue   血液、淋巴組織     diffuse_large_B_cell_lymphoma     彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤

A-375細(xì)胞株  F       skin  皮膚；外皮     NS    不明確

A4/Fuk細(xì)胞株         F       haematopoietic_and_lymphoid_tissue   血液、淋巴組織     diffuse_large_B_cell_lymphoma     彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤

A-498細(xì)胞株  F       kidney       腎臟         renal_cell_carcinoma      腎細(xì)胞癌

A549細(xì)胞株   M     lung 肺     non_small_cell_carcinoma      非小細(xì)胞癌

A-673細(xì)胞株  F       bone         骨骼         NS    不明確

A-704細(xì)胞株  M     kidney       腎臟         renal_cell_carcinoma      腎細(xì)胞癌

ABC-1細(xì)胞株 M     lung 肺     non_small_cell_carcinoma      非小細(xì)胞癌

ACC-MESO-1細(xì)胞株                 pleura       胸膜； 肋膜  NS    不明確

ACHN細(xì)胞株  M     kidney       腎臟         renal_cell_carcinoma      腎細(xì)胞癌

AGS細(xì)胞株     F       stomach  胃；腹部         adenocarcinoma      腺癌；惡性腺瘤

Alexander cells細(xì)胞株   M     liver 肝     hepatocellular_carcinoma       肝癌

697  細(xì)胞株M        haematopoietic_and_lymphoid_tissue   血液、淋巴組織     acute_lymphoblastic_B_cell_leukaemia          急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病23132/87

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