HaCaT細(xì)胞，人永生化表皮細(xì)胞形態(tài)

產(chǎn)品名稱：HaCaT細(xì)胞

中文名稱：人永生化表皮細(xì)胞

來(lái)源：人皮膚

類別：類屬于正常細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)基：DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃，5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液，消化 5-10min

主營(yíng)細(xì)胞：DC2.4細(xì)胞，HOS細(xì)胞，3D4/21細(xì)胞，HCAEC細(xì)胞，Tca-8113細(xì)胞，NCI-H460細(xì)胞，MCF-7細(xì)胞，U251細(xì)胞

消化比例：1：4-1：10

換液時(shí)間：2-3 天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基，10%FBS，5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

主營(yíng)細(xì)胞：CNE細(xì)胞，MADB-106細(xì)胞，Sf9細(xì)胞，HOC細(xì)胞，3T3-L1細(xì)胞，THP-1細(xì)胞。

若客戶收到2ml小管HaCaT細(xì)胞，人永生化表皮細(xì)胞形態(tài)

收到細(xì)胞以后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶，加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度：若未超過(guò)80%匯合度，換液繼續(xù)培養(yǎng)，根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過(guò)80%匯合度，可直接進(jìn)行傳代（細(xì)胞貼壁處理方法）。

1、細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作。

2、鏡下觀察：將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，按要求比例消化傳代。（收到細(xì)胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

3、消化方法：

1、將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到細(xì)胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀察，等細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)后，加培養(yǎng)基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。

慧穎生物購(gòu)買HaCaT細(xì)胞，人永生化表皮細(xì)胞形態(tài)注意事項(xiàng)：

1、客戶在收到細(xì)胞時(shí)，請(qǐng)首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否外滲，培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有瓶破、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏郊?xì)胞后立即與我們 王。

2、由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)離心收集，重懸細(xì)胞，置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力。

3、收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)按照細(xì)胞處理方法處理細(xì)胞。