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新學(xué)期慧穎*供應(yīng)人肝癌細(xì)胞系,種類zui多,價(jià)格*惠,每一株細(xì)胞來(lái)源清晰,保證*狀態(tài),活力達(dá)96%,復(fù)蘇周期短,出庫(kù)前經(jīng)QC檢測(cè),售后及時(shí)到位,:!
細(xì)胞凍存主要操作步驟:
1.選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。
2.去上清液,加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。
3.將上述細(xì)胞分裝于安瓿或冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要*封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。
4.將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放隔夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí)(此步可省略),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),zui后沉入液氮中。
細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
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在實(shí)際操作中,凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇,再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。
在細(xì)胞復(fù)蘇操作時(shí),應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快,可不時(shí)搖動(dòng)安瓿或冷凍管,使之盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。這樣復(fù)蘇的凍存細(xì)胞存活率高,生長(zhǎng)及形態(tài)良好。然而,由于凍存的細(xì)胞還受其他因素的影響,有時(shí)也會(huì)有部分細(xì)胞死亡。此時(shí),可將不貼壁、飄浮在培養(yǎng)液上(已死亡)的細(xì)胞輕輕倒掉,再補(bǔ)以適量的新培養(yǎng)液,也會(huì)獲得較為滿意的結(jié)果。
產(chǎn)品名稱:人肝癌細(xì)胞系
供應(yīng)商:ATCC ECACC Sciencell IKA等中心
供應(yīng)商鏈接:上海鶴旋路26弄20號(hào)
:王
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人腦成纖維細(xì)胞 | 大鼠角膜成纖維細(xì)胞 | 小鼠牙乳頭細(xì)胞 |
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人食管癌組織源成纖維細(xì)胞 | 大鼠食管平滑肌細(xì)胞 | 小鼠食管平滑肌細(xì)胞 |
人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞 | 大鼠腸平滑肌細(xì)胞 | 小鼠腸平滑肌細(xì)胞 |
人臍靜脈血來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞 | 大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞 | 小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞 |
人間充質(zhì)干細(xì)胞 | 大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 小鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞 | 大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
*供應(yīng)人肝癌細(xì)胞系;由上?;鄯f生物提供人肝癌細(xì)胞的價(jià)格、技術(shù)、咨詢服務(wù)等,佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。迅速放入 38℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其*融化,然后在無(wú)菌下取出細(xì)胞。復(fù)蘇培養(yǎng),供應(yīng)肝癌細(xì)胞狀態(tài)良好、*!
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