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JEG-3細胞*人絨毛膜癌細胞
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細胞介紹:這是一株超三倍體人類細胞株。其典型染色體數為71,發(fā)生率為34%,多倍體率為2.6%。
來源:絨毛膜癌
形態(tài):上皮細胞樣
污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
培養(yǎng)條件:MEM培養(yǎng)基+10% FBS
細胞凍存:液氮凍存(基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS
細胞運輸:干冰運輸(1 Vial)或活細胞運輸(T-25 flasks)
細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療詳細介紹
預防細胞污染:
1. 實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30~60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風機運轉20min左右再開始實驗操作。
2. 實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。
3. 每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。
4. 操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。
5. CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應1~2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2~3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,zui后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水(應每周更換),待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。
6. 定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。
JEG-3細胞*人絨毛膜癌細胞 ;當您收到細胞時,請首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否外滲,培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現有瓶破,滲漏,培養(yǎng)液混濁等問題,請在收到細胞后立即與我們,確認細胞現狀,產品是否完備。 由于運輸過程中出現的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態(tài)時,請客戶不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應立即將培養(yǎng)瓶放置于37℃ CO2細胞培養(yǎng)箱隔夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按本注意事項第3項下懸浮細胞的方法處理;如臺盼藍染色證實細胞無活力,請在收到細胞48小時內拜力細胞專家 王老師 。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
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細胞狀態(tài)不好解決方法:培養(yǎng)基一次不要配太多,根據用量決定。
細胞外源微生物的污染:細胞不宜長期體外培養(yǎng),因為外源微生物污染的幾率大大提高。易發(fā)現和難發(fā)現的,影響細胞狀態(tài)。
建議:實驗前凍存一批細胞,隔幾個月重新復蘇。既保證實驗所用細胞代數*,又將外源污染的后果降到zui低。
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