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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:NCI-H1975細(xì)胞,人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;美國(guó)ATCC來(lái)源,保藏技術(shù)50年,傳代次數(shù)少,活力>50%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染,*!
NCI-H460細(xì)胞:http://www.chem17.com/st226901/product.html
DC2.4細(xì)胞:http://www.chem17.com/st226901/product_15641727.html
HT-22細(xì)胞:http://www.chem17.com/st226901/product_15222117.html
細(xì)胞基原料:http://www.chem17.com/st226901/erlist_673470.html
Gibco胎牛血清:http://www.chem17.com/st226901/erlist_646360.html
細(xì)胞成活率形態(tài)學(xué)觀察法及檢測(cè)法:
細(xì)胞成活率,判斷之形態(tài)學(xué)觀察法:
胞內(nèi)出現(xiàn)顆?;蚩张?。
細(xì)胞內(nèi)如果出現(xiàn)顆粒物質(zhì),表明細(xì)胞處于非健康狀態(tài)。
同樣,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡也說(shuō)明細(xì)胞處于非健康狀態(tài)。
細(xì)胞喪失雙折射性:
如果發(fā)生在單層細(xì)胞:一個(gè)具有雙折射性的正常細(xì)胞逐步失去這一特征(相差顯微鏡下細(xì)胞邊緣成暈環(huán)),則提示該細(xì)胞已經(jīng)死亡,即zui終干枯死亡。
如果發(fā)生在懸浮細(xì)胞:正常懸浮細(xì)胞清晰透明,如胞內(nèi)出現(xiàn)顆?;蜃儨啙岜砻骷?xì)胞受損,甚至死亡。
怎樣去除死細(xì)胞?單層培養(yǎng)的細(xì)胞死亡后,一般會(huì)漂浮起來(lái),因此不需要特殊處理。
而懸浮細(xì)胞或原代培養(yǎng)細(xì)胞則要通過(guò)密度離心(如Ficoll梯度)方法收集死細(xì)胞。
細(xì)胞成活率檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
即刻檢測(cè)實(shí)驗(yàn)——
染料柜染實(shí)驗(yàn):原理——萘黑、臺(tái)盼藍(lán)以及很多其他染料均不能透過(guò)活細(xì)胞。概要——將細(xì)胞懸液與染料混勻,在低倍顯微鏡下檢查。材料包括無(wú)菌材料,即細(xì)胞;生長(zhǎng)液;0.25%胰酶;PBSA.非滅菌材料即:血細(xì)胞計(jì)數(shù)板;生存力染料;巴斯德吸管;顯微鏡;手執(zhí)計(jì)數(shù)器。操作步驟:
1、用胰蛋白酶消化或離心,重懸制備高深度的細(xì)胞懸液
2、取一塊干凈的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,將蓋玻片固定在適當(dāng)位置上。
3、將一<滴細(xì)胞懸液和一滴(臺(tái)盼藍(lán))或四滴(萘黑)染料混勻/li>
4、加至血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室中。
5、靜置1~2min(但不要放置很久,否則活細(xì)胞會(huì)受到損傷而吸收染料)。
6、將計(jì)數(shù)板置于顯微鏡下,用10倍物境找到計(jì)數(shù)網(wǎng)格。
7、計(jì)數(shù)細(xì)胞總及著色細(xì)胞的數(shù)目。
8、清洗血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,放入盒內(nèi)。
實(shí)驗(yàn)分析-計(jì)算未著色細(xì)胞的百分?jǐn)?shù),該數(shù)字即為本方法所得出的細(xì)胞生存力百分?jǐn)?shù)。
據(jù)統(tǒng)計(jì),原代培養(yǎng)細(xì)胞成活率一般為50%~90%。細(xì)胞系一般為90%~100%存活。凍融細(xì)胞一般為50%~80%存
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NCI-H1975細(xì)胞,人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞
公司所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
細(xì)胞狀態(tài)不好解決方法:培養(yǎng)基一次不要配太多,根據(jù)用量決定。
細(xì)胞外源微生物的污染:細(xì)胞不宜長(zhǎng)期體外培養(yǎng),因?yàn)橥庠次⑸镂廴镜膸茁蚀蟠筇岣摺R装l(fā)現(xiàn)和難發(fā)現(xiàn)的,影響細(xì)胞狀態(tài)。
建議:實(shí)驗(yàn)前凍存一批細(xì)胞,隔幾個(gè)月重新復(fù)蘇。既保證實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞代數(shù)*,又將外源污染的后果降到zui低。
所有細(xì)胞入庫(kù)之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量檢測(cè)和鑒定
所有細(xì)胞在出庫(kù)之前均經(jīng)過(guò)一次嚴(yán)格的質(zhì)檢認(rèn)證
確保細(xì)胞到每一位用戶手里都是狀態(tài)
合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的zui重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。
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