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SK-OV-3【卵巢癌細胞】細胞傳代

發(fā)布時間:2016-02-17瀏覽:2326次

SK-OV-3【卵巢癌細胞】細胞傳代

細胞介紹:SK-OV-3細胞為人卵巢癌細胞,來源于人卵巢癌,中文名為人卵巢癌細胞,正常的細胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長。SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。 此細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤,且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。 在本庫通過支原體檢測。

細胞名稱:SK-OV-3【卵巢癌細胞】

來源:人卵巢腺癌

培養(yǎng)基:RPMI-1640 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2

消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液,消化5-10min

傳化比例:1:2-1:6

換液時間:3-4天換液一次

凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存

SK-OV-3【卵巢癌細胞】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。

SK-OV-3【卵巢癌細胞】懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

 

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SK-OV-3【卵巢癌細胞】培養(yǎng)用液pH對細胞生長的影響:

由于大多數細胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細胞將產生不良的影響。各種細胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。

但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些,偏酸環(huán)境中更利于細胞生長。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時,可把液體的pH稍微調得偏酸一些。培養(yǎng)基在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右。

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