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器材
?。?)聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
?。?)小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
?。?)4℃冰箱,37℃孵育箱。
試劑
(1)包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):NaHCO31.59克NaHCO32.93克加蒸餾水至1000ml
?。?)洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15MKH2PO40.2克Na2HPO4·12H2O2.9克NaCl8.0克KCl0.2克Tween-200.05%0.5ml加蒸餾水至1000ml
(3)稀釋液:牛血清白蛋白(BSA)0.1克加洗滌緩沖液至100ml或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。(4)終止液(2MH2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
?。?)底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L)24.3ml加蒸餾水50ml。(6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5)10ml0.75%H2O232μl
?。?)ABTS使用液:ABTS0.5mg底物緩沖液(PH5.5)1ml3%H2O22μl
(8)抗原、抗體和酶標記抗體。
(9)正常人血清和陽性對照血清。
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